ABSTRACT
En Paraguay la enfermedad de Chagas es endémica, siendo el número de personas infectadas de aproximadamente 165.000 y la población expuesta del 30% según registros del 2012. El objetivo del trabajo fue evaluar el ELISA Chagas test IICS V2.0 para tamizaje de la enfermedad en muestras de donantes de sangre. Se realizó un estudio transversal de pruebas diagnósticas, para lo que se incluyeron 775 muestras de suero provenientes de dos bancos de sangre, a partir de cuyos resultados se calculó la sensibilidad, valores predictivos positivo, negativo y la curva ROC. También se determinó la concordancia y correlación entre el ELISA Chagas test IICS V2.0 y un ELISA comercial. De las 775 muestras de bancos de sangre analizadas se obtuvo una sensibilidad del 99%, especificidad de 96%, VPP 96%, VPN 99% y un índice kappa igual a 0,95 (0,93-0,97) Error Estándar (EE) 0.01 y p>00001 y el área ROC igual a 0,9835. Con respecto a la concordancia con el test comercial, el índice kappa fue de 0,926 IC95% (0,888-0,976), p=0,00001 y el coeficiente de correlación r=0,971 IC95% (0,962-0.978) p=0,0001. Las concordancias obtenidas fueron muy buenas con respecto a la serología de las muestras de banco de sangre como la comparada con el test comercial, pudiendo utilizarse el kit de Chagas IICS V2 para el tamizaje de la enfermedad.
In Paraguay, Chagas disease is endemic, with approximately 165,000 infected people and 30% of the exposed population according to 2012 records. The objective of this study was to evaluate the ELISA Chagas test IICS V2.0 for screening of the disease in blood donor samples. We carried out a cross-sectional study of diagnostic tests, including 775 serum samples from two blood banks, and then calculating sensitivity, positive and negative values and the ROC curve. We also determined the concordance and correlation between the ELISA Chagas test IICS V2.0 and commercial ELISA. In the 775 blood bank samples analyzed, the Chagas ELISA test IICS V2.0 obtained a sensitivity of 99%, specificity of 96%, PPV 96%, NPV 99% and a kappa index equal to 0.95 (0.93-0.97) Standard Error (SE) 0.01 and p>0.0001 and the ROC area equal to 0.9835. Regarding the concordance with the commercial test, the kappa index was 0.926 CI95% (0.888-0.976), p=0.00001 and the correlation coefficient r=0.971 CI95%(0.962-0.978) p=0.0001.The concordances obtained were very good with respect to the serology of the blood bank samples as compared to the commercial test, allowing the use of the Chagas IICS V2 kit for the disease screening.
ABSTRACT
La toxoplasmosis es una enfermedad endémica con prevalencia mundial variable, cuyo agente causal es el parásito Toxoplasma gondii. Para un diagnóstico certero de la infección por T. gondii son necesarias combinaciones de métodos serológicos. Estudios recientes han reportado que la técnica de Western Blot permite evidenciar proteínas antigénicas como marcadores de la infección, así como ciertos perfiles proteicos como posibles indicadores de las fases de la infección, aguda y crónica. El objetivo del estudio fue identificar el perfil antigénico específico asociado a las diferentes fases de la toxoplasmosis. Fueron incluidos en el estudio 55 sueros de embarazadas con toxoplasmosis, diferenciados en fase aguda y crónica de la enfermedad por medio del método de ELISA de Avidez de IgG. Mediante el método de Western Blot se observó que las proteínas antigénicas p35, p43, p45, p56 y p107 fueron reconocidas por el 20- 60% de los sueros de pacientes en fase aguda, mientras que p65, p95, p98 y p113 fueron reconocidas por el 17-35% de sueros de pacientes en fase crónica. Se observó que seis proteínas antigénicas, p32, p38, p41, p48, p59 y p72, fueron reconocidas por más del 60% de los sueros de pacientes tanto en fase aguda como crónica. Los resultados obtenidos sugieren que estas seis proteínas podrían ser consideradas como marcadores diagnósticos de la enfermedad(AU)
Toxoplasmosis is an endemic disease with variable global prevalence, being the causative agent the parasite Toxoplasma gondii. For an accurate diagnosis of a T. gondii infection, combinations of serological methods are required. Recent studies have reported that the Western Blot technique allows the detection of antigenic proteins as markers of infection, as well as certain protein profiles as possible indicators of acute and chronic phases of infection. The objective of the study was to identify the specific antigenic profile associated with different phases of toxoplasmosis. Fifty five sera from pregnant women with toxoplasmosis were included in the study, differentiated in acute and chronic phase of the disease by an IgG Avidity ELISA. By using the Western Blot method it was observed that antigenic proteins p35, p43, p45, p56 and p107 were recognized by 20-60% of sera from patients in acute phase, while p65, p95, p98 and p113 were recognized by 17-35% of sera from patients in chronic phase. It was observed that six antigenic proteins, p32, p38, p41, p48, p59 and p72, were recognized by more than 60% of sera from patients in both acute and chronic phases. The results obtained in this study suggest that these six proteins could be considered as diagnostic markers of the disease(AU)
Subject(s)
Humans , Animals , Female , Pregnancy , Rats , Toxoplasmosis/immunology , Blotting, Western , Antigens, Protozoan , Rats, Inbred Strains , Toxoplasma/immunology , Protozoan Proteins , Toxoplasmosis/diagnosis , Acute Disease , Chronic Disease , Electrophoresis, Polyacrylamide GelABSTRACT
La toxoplasmosis es una enfermedad zoonótica de prevalencia mundial, causada por un parásito intracelular Toxoplasma gondii que infecta a los seres vivos y tiene como hospedador definitivo a los felinos. El presente estudio tuvo como objetivo determinar la seroprevalencia de toxoplasmosis y factores de riesgo asociados en mujeres en edad reproductiva no embarazadas que asistieron al Hospital Distrital de Lambaré, Paraguay. Se obtuvieron muestras de suero de 185 mujeres y se analizaron mediante ELISA Chagas IICS-UNA para la detección de anticuerpos IgG específicos contra T. gondii. Se utilizaron encuestas diseñadas para recoger datos demográficos y factores de riesgo. Se aplicó estadística descriptiva y la prueba de chi-cuadrado y OR (odds ratio) para establecer asociación entre las variables higiénicas, alimenticias y de conocimiento con la toxoplasmosis. De las 185 participantes, 117 presentaron IgG anti-T gondii, que representa una prevalencia de 63% IC95 (56,2-69,7%). El nivel de conocimiento fue el único factor de riesgo que se asoció en forma significativa con la serología positiva para toxoplasmosis. Aunque los demás factores de riesgo no alcanzaron significancia estadística, probablemente debido a la alta seroprevalencia en esta población, sin lugar a duda los mismos contribuyen en gran medida a la propagación de la infección.
Toxoplasmosis is a zoonotic disease of worldwide prevalence, caused by an intracellular parasite Toxoplasma gondii that infects living beings and has as its final host the felines. The present study aimed to determine the seroprevalence of toxoplasmosis and associated risk factors in non-pregnant reproductive age women attending the Hospital District of Lambaré, Paraguay. Serum samples were obtained from 185 women and analyzed by ELISA for the detection of IgG antibodies specific for T. gondii. Surveys designed to collect demographic data and risk factors were used. Descriptive statistics were applied and chi2 and OR (odds ratio) were calculated for the analysis of hygienic, nutritional and knowledge variables. Of the 185 participants, 117 presented positive serology for anti-T. gondii IgG, yielding a prevalence of 63% IC95 (56,2-69,7). The level of knowledge was The only risk factor significantly related to to positive serology for toxoplasmosis. Although the other risk factors were not statistically significant, probably due to the high seroprevalence in this population, there is no doubt that they contributgreatly to the spread of the disease.
Subject(s)
Female , Humans , Adolescent , Adult , Public Health , Toxoplasmosis , Gestational Age , Risk Factors , Seroepidemiologic StudiesABSTRACT
El parásito Trypanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas. El mismo presenta una amplia diversidad biológica y genética, por lo cual se lo agrupa en 6 unidades taxonómicas discretas. Las cepas Y, CL Brener y una aislada en Paraguay aún no caracterizada en su totalidad fueron empleadas en este estudio con el fin de determinar sus perfiles proteico y antigénico para aportar en la investigación sobre esta enfermedad en nuestro país, aplicando técnicas como SDS-PAGE, ELISA y Western blot. Se observaron semejanzas en los perfiles proteicos de los extractos solubles de Y Lote 73 e Y Lote 74, siendo ambos obtenidos a partir de la misma cepa, así como perfil diferente de éstos con los de CL Brener y Py. Se detectaron bandas de proteínas de pesos moleculares comunes entre extractos, principalmente las consideradas de bajo peso molecular. Se constató la capacidad antigénica al ensayar los 4 extractos frente a sueros chagásicos, no chagásicos, controles positivos y negativos, se evidenció la importancia de confirmar el diagnóstico con pruebas de principios diferentes. Además, se detectaron proteínas antigénicas comunes a los 3 extractos empleados en el Western blot, las que podrían ser estudiadas con mayor profundidad debido a su potencial antigénico, característica de interés para fines diagnósticos.
The parasite Trypanosoma cruzi is the causal agent of Chagas disease.It presents a wide biological and genetic diversity, therefore it is grouped into 6 taxonomic units..The strains Y, CL Brener and one strain isolated in Paraguaywere used in this study in order to determine their protein and antigenic profiles, applying techniques such as SDS-PAGE, ELISA and Western blot. Similarities were observed in the protein prifles of the soluble extracts of Lot 73 Y and Lot 74 Y both obtained from the same strain, and the different profile of these with those of CL Brener and Py strains. Protein bands of common molecular weights, manly those consideredlow, were detected between extracts. By testing the four extracts against chagasic and non-chagasic sera, positive and negative controls, the antigenic capacity was verified and the importance of utilizing different test to confirm diagnosis was shown. In addition antigenic proteins common to the three extracts used in the Western blot were detected and can be further investigated due to their antigenic potential, an interesting characteristic for diagnostic purpose.
Subject(s)
Blotting, Western , Chagas Disease , Trypanosoma cruziABSTRACT
La leishmaniosis visceral es una enfermedad causada por protozoos del género Leishmania, afecta fundamentalmente al hombre y a los caninos, englobando un amplio espectro de procesos patológicos que parten desde cuadros cutáneos autocurables a viscerales con desenlace fatal. La leishmaniosis se conoce en Paraguay desde los años 1913; y se observa un aumento de los casos en paralelo al proceso de deforestación y expansión agrícola. La infección en los caninos es causada por parásitos del género Leishmania complejo L. donovani, especies L. infantum en el viejo mundo y L. chagasi en el nuevo mundo. Entre las técnicas de diagnóstico serológico se destacan la aglutinación directa (DAT), la inmunofluorescencia indirecta (IFI), el ELISA, la inmunocromatografía y el inmunoblotting. La sensibilidad y especificidad de cada una de ellas dependen en gran medida del antígeno utilizado. Sin embargo, pocos análisis comparativos se han hecho con tests que utilizan diferentes antígenos para identificar el mejor antígeno. El trabajo realizado fue un estudio analítico que tuvo como objetivo comparar a las dos cepas de leishmania: L. chagasi y L. donovani utilizadas en el ELISA indirecto para el diagnóstico serológico de leishmaniosis visceral canina que se realiza en el IICS. Del total de muestras analizadas, 173/185 (94%) resultaron concordantes. Utilizando la prueba de ELISA con antígeno L. chagasi como referencia, el antígeno de L. donovani dio una positividad y negatividad del 92% y 100% respectivamente. Se obtuvo una excelente concordancia (Kappa 0.82) y una fuerte asociación de 125.29 (p<1x10-7) por chi2. Estos resultados sugieren que el antígeno L. donovani podría ser utilizado en el ELISA indirecto para la detección de anticuerpos anti-leishmania en caninos
Subject(s)
Leishmania donovani , Leishmania infantum , Serologic TestsABSTRACT
El objetivo de este estudio fue realizar un diagnóstico de la exactitud de los resultados emitidos por los laboratorios en el tamizaje serológico para T. cruzi, sífilis, hepatitis B y HIV. Este es un estudio descriptivo de corte transversal, donde participaron 14 de bancos de sangre de los 27 registrados en el Centro Nacional de Transfusión Sanguínea del Ministerio de Salud y 10 de Análisis Clínicos que realizaban perfiles serológicos para Bancos de Sangre. Cada laboratorio recibió un panel de sueros positivos y negativos para las infecciones mencionadas a ser testado y una encuesta para indagar los métodos y reactivos utilizados así como el número de muestras procesadas por día, mes y año. Los resultados de esta primera evaluación revelan problemas de inexactitud en todas las infecciones. Los porcentajes de falsos negativos y positivos por laboratorio oscilaron del 20 al 64 por ciento y del 9 al 20 por ciento respectivamente, según laboratorio y determinación. Un promedio de 5 laboratorios arrojaron porcentajes de bajos de concordancia para T. cruzi, hepatitis, B y HIV, mientras que 14 laboratorios mostraron resultados inexactos en sífilis. Estos hallazgos muestran la necesidad de implementar una red de garantía de calidad, que centre sus actividades en la supervisión de los procedimientos y en el asesoramiento de controles de calidad interno y externo en los laboratorios
Subject(s)
Quality Control , SerologyABSTRACT
El interés actual por técnicas inmunológicas para evaluación serológica en humanos con fines diagnòsticos, y el costo elevado de los reactivos de procedencias extrajera nos ha motivado a comunicar el proceso empleado en la producción de anticuerpos policlonales en el Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Para lo cual desarrollamos la obtención de anticuerpos anti-IgG humano, anti-Trypanosoma cruzi y antiToxoplasma gondii, por inmunización en cabras y purificación por cromatografía de intercambio iónico en Dietilaminoetil Celulosa. Se considera como esquema óptimo de inmunización un periodo de seis meses, con refuerzos periódicos mensuales y uno final de mayor concentración de inmunógeno, previo al sangrado total de las cabras. Esto se recomienda comparando los resultados obtenidos con los esquemas de inmunización 4 y 6 meses realizados en el presente trabajo. Se obtuvieron inmunoglobulinas especificas con este protocolo, de manera a utilizarlos con distintos propósitos como son la producción de reactivos de Inmunoenzimáticos para T. cruzi y T. gondii, así como también en preparación de inmunoconjugados para usos en inmunofluorescencia. Esto nos llevó a desarrollar técnicas que en esta primera etapa nos servirá para aumentar y mantener la producción de reactivos del IICS. Al mismo tiempo elaborar nuevos anticuerpos que serán utilizados en el desarrollo de métodos de captura de IgM para detección de T. cruzi y T. gondii en fase aguda
Subject(s)
Immunization , Toxoplasma , Trypanosoma cruziABSTRACT
La leishmaniasis visceral es una enfermedad sistémica causada por ls diseminación de parásitos del complejo donovani a través del sistema retículoendotelial. Aparece en las grandes urbes al darse una adecuada combinación de factores, como la adaptación del vector a un nuevo medio ambiente y la presencia del principal reservorio de la enfermedad en las ciudades, el perro doméstico. A raíz del diagnóstico parasitológico que se realizó en una biopsia nasal de un perro de raza en el Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud en 1994, se inició una intensiva investigación con veterinarios de Hospital de la Facultad de Ciencias Veterinarias y clínicas veterinarias. Desde enero de 1997 hasta agosto de 1998 fueron examinados serológicamente 580 perros con síntomas compatibles con la enfermedad, resultando positivos 198 (34,14 por ciento). Las razas más afectads en orden decreciente fueron la mestiza, ovejero alemán, Dobermann, Boxer y Rottweiler. Los municipios con mayor número de casos fueron Asunción, Lambaré, San Lorenzo, Villa Elisa, Fernando de la Mora, Areguá, confirmándose casos clínicos en 28 barrios de Asunción. El mayor número de casos se encontró en animales de 2 y 3 años, y los síntomas más frecuentes fueron lesiones en las orejas, hocico, ojos, piel, patas, mucosa y cara. También fueron observados pérdida de peso, hipertrofia ganglionar, fiebre y crecimiento de uñas. Este trabajo enfocó animales con síntomas compatibles de infección con L. cvhagasi, por lo tanto no refleja la prevalencia real de la enfermedad. De manera a determinar la dinámica de la infección en Paraguay son necesarios estudios epidemiológicos en nuestras representativas
Subject(s)
Animals , Dogs , Dog Diseases , Leishmaniasis, Visceral , Leishmaniasis/diagnosis , Leishmaniasis/nursing , Water Reservoirs , ParaguayABSTRACT
El objetivo del presente estudio fue comparar la sensibilidad y especificidad relativas del ELISA Toxo IgM (I.I.C.S. - Paraguay), el VIDAS Toxo IgM (Biomeriux - Francia), el IFI IgM (Biomeriux - Francia) y el ELISA Platelia Toxo IgM (Pasteur). Los resultados obtenidos con este último reactivofue considerado como estándar de oro para este estudio. Se utilizó un panel de 250 sueros de la seroteca del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, de los cuales 130 muestras de sueros fueron provenientes de individuos con infección aguda (1 a 15 meses post infección) y 100 de individuos con serología negativa para toxoplasmosis. Las sensibilidades relativas de los reactivos de ELISA IgM ,IFI IgM y VIDAS IgM fueron 95 por ciento, 40 por ciento y 70 por ciento, mientras que las especificidades fueron de 87 por ciento, 96 por ciento y 100 por ciento, respectivamente. El ELISA IgM Toxo Test (I.I.C.S. - Paraguay) presentó mejor sensibilidad pero también se observó la mayor cantidad de resultados falsos positovos en pacientes con infección antigua o crónica. En base a los resultados obtenidos en este estudio recomendamos la utlización del reactivo de ELISA IgM I.I.C.S. para tamiseje pre-natal por su alta sensibilidad y los métodos de IFI y VIDAS IgM para confirma un diagnóstico de infección aguda por su alta especificidad
Subject(s)
Sensitivity and Specificity , Serologic Tests , ToxoplasmaABSTRACT
En el Instituto de Investigaciones en Ciencia de la Salud hemos implementado la técnica desarroollada por Pullen (1986) que utiliza tiocianato de amonio con agente disociente para le detección de avidéz de IgG por el método de Elisa-Toxo IgG (I.I.C.S., Paraguay)-. Por lo tanto , hemos realizado este estudio con el objeto de determinar la avidéz de IgG anti T. gondii en una población de mujeres embarazadas, donde 20 muestras eran de pacientes en fase aguda y 130 de paciente en fase crónica, previamente diagnosticadas clinica y serológicamente. En la distribución de valores de índice de avidéz de IgG anti-T. gondii de encontró una medida del 1,09+-0,33 en pacientes agudos y 1,91+-0,18 en pacientes crónicos, siendo la diferencia entre ambos grupos estadisticamente significativa (p<0,05). Los indices de avidéz se mantuvieron bajos ( menor a 1,5 molar de tiocianato) por más de dos meses post infección, por lo tanto la baja avidéz de IgG no es método ideal para detectar una infección aguda, pero sin embargo la presencia de una alta avidéz confirma una infeción crónica o antigua, que podemos utilizar como apoyo al diagnóstico de toxoplasmosis en la mujer embarazada
Subject(s)
Serologic Tests , ToxoplasmosisABSTRACT
En este estudio investigamos la utilidad del test de aglutinación indirecta con partículas de gelatina (PG) para el diagnóstico serológico de la infección por Trypanosoma cruzi. Los resultados fueron comparados con una prueba de ELISa. La sensibilidad del (PG) fue del 93.6 por ciento y la especificidad de 92 por ciento. Este test presenta muchas vantajas como portador de antígeno, así como también en su manejo, la lectura de los resultados y la preservación por largo período de tiempo. Recomendamos su uso para tamizajes en bancos de sangre, debido a que es simple y rápido y porque no utiliza equipos sofisticados puede ser muy util en zonas en donde no se cuenta con electricidad
Subject(s)
Agglutination , Chagas Disease , Sensitivity and SpecificityABSTRACT
Este es un estudio descriptivo de cohorte para determinar cual era la transmisiòn congènita de toxoplasmosis en recièn nacidos de madres seropositivas por medio de la detecciòn de anticuerpos IgG e IgM anti T. gondii al nacer, y por seguimiento durante el primer año de vida a 50 niños de madres que dieron a luz en tres maternidades del Paraguay. El motivo que nos llevò a realizar este estudio es que nuestro paìs algunos gineco-obstetras apoyan la teorìa de que la transmisiòn puede efectivizarse por reactivaciòn de una infecciòn crònica. La serologìa basal fue realizada en sangre de cordòn de 632 niños del Instituto de Previsiòn Social (IPS), en suero de 500 madres de la Maternidad del Hospital de Clìnicas y en suero de 346 madres de puestos de salud del Dpto. de San Pedro. Las seroprevalencias de infecciòn a T. gondii detectadas en estas poblaciones fueron de 70 por ciento y 72 por ciento y 89 por ciento respectivamente. La prueba serològica empleada en el tamizaje basal fue el mètodo de ELISA indirecto, y en el seguimiento el ELISA doble sandwich para la detecciòn de IgM anti T. gondii. Se detectò un solo caso positivo con probable infecciòn congènita en la poblaciòn basal de 632 niños estudiados en la Maternidad del Instituto de Previsiòn Social. En los resultados serològicos obtenidos en los 50 niños, todos dieron resultados negativos por la prueba para detecciòn de anticuerpos IgM anti T. gondii al nacer y durante el primer año de vida. Presentando uno de ellos, seroconversiòn a los 15 meses, probablemente por infecciòn adquirida. La ausencia de transmisiòn congènita de toxoplasmosis en los niños del estudio, cuyas madres tenian serologìa de infecciòn crònica apoya la teorìa mundialmente reconocida que el riesgo de transmisiòn es en aquellas madres con primoinfecciòn durante el embarazo. Por esta razòn en paìses como el nuestro donde el diagnòstico de infecciòn congènita es muy costoso, serìa conveniente realizar un estudio serològico previo al llegar la mujer a la edad fèrtil.
Subject(s)
Serologic Tests/nursing , Toxoplasma/parasitology , Toxoplasma/chemistry , Toxoplasmosis, Congenital/nursing , Toxoplasmosis, Congenital/epidemiologyABSTRACT
El presente estudio se realizó con el objetivo de determinar el rendimiento en exactitud de una cohorte de 58 laboratorios de análisis clínicos de Asunción. Los mismo participaron en forma ininterrumpida en programa de Evaluación Externa de la Calidad en Química Clínica de la Asociación de Bioquímicos y el Instituto de Investigaciones Ciencias de la Salud, en los años 1991 a 1994. En ese periódo se llevarón a cabo 9 evaluaciones de exactitud utilizando sueros control a un solo nivel de concentración en los que se midieron 13 analitos. En los primeros años se llevó a cabo un programa de intervención educativa en control de calidad interno en 71 laboratorios en forma confidencial y voluntaria, de los cuales 25 por ciento fueron públicos y 75 por ciento privados. Solo el 35 por ciento(25/71) de los laboratorios tuvo rendimiento satisfactorio, manteniendose este resultado hasta 12 meses después de la intervención. En los años posteriores, 58 laboratorios continuaron participando de la evaluaciones externas y de los cursos de capacitación. En las 9 evaluaciones se empleó el criterio del Colegio de Patólogos Americanos (CAP), que califica un rendimiento como satisfactorio por laboratorio cuando el 80 por ciento de los resultados son buenos o satisfactorios. Al analisar el rendimeinto de los 58 laboratorios que continuaron en forma ininterrumpida el estudio, detectamos un cambio significativo (p=0,002) a los 18 meses post-intervención educativa, con un rendimiento satisfactorio en el 67 por ciento (39/58) de los laboratorios. Dicho rendimiento se mantuvo hasta el final del estudio en el grupo de laboratorios, siendo a los 48 meses de 86 po ciento (50/58). En la comparación de la precisión interlaboratorio de 1991 a 1994, se observó que los coeficientes de variación se mantuvieron en su mayoria por encima de los alcanzados por el United Kigdom national External Quality Assessment Scheme. Los resultados de nuestros estudios sugieren que contínuos y regulares programas de evaluación externa de calidad contribuyen a mejorar el rendimiento de los laboratorios. Sin embargo, en nuestro país los coeficientes de variación continúan elevados, probablemente debido a que son aun pocos los laboratorios que tienen implementado un programa de control interno de claidad.
Subject(s)
Biochemistry , Quality ControlABSTRACT
La enfermedad de Chagas y la Leishmaniasis cutánea y mucocutánea son endémicas en el Paraguay y existen zonas del país donde coexisten ambas infecciones. Sabido es que existen reacciones cruzadas entre la infección por Trypanosoma cruzi y por Leishmaniasis sp, lo que constituye un problema para el diagnóstico diferencial, tema que ha sido considerado de la alta prioridad por la OMS. Al Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS) y al Laboratorio Central del Ministerio de Salud concurren pacientes provenientes de zonas de alta y media endemia para las dos infecciones, en los cuales el diagnóstico serológico diferencial está limitado por conocimiento insuficiente sobre reacciones cruzadas en nuestra población. Por dicho motivo se estudió en una primera etapa la sensibilidad y la especificidad de los métodos serológicos de ELISA e IFI para la detección de anticuerpos IgG anti Leishmania sp en donde se utilizó como método de referencia la Intradermo Reacción de Montenegro (IDRM). La sensibilidad y la especificidad de ELISA fué solo del 49 por ciento y 67 por ciento y la de IFI 27 por ciento y 75 por ciento respectivamente. En una segunda etapa se estudió cual era la factibilidad de diferenciar una infección a Leishmania sp de una infección a T. cruzi, utilizando en paralelo el método de ELISA para la detección de cada uno de los antígenos mencionados y testando los sueros positivos por inmunoblotting para anti T. cruzi. En los resultados se encontró resultados idénticos por ambos ELISA, mostrandonos una fuerte reacción cruzada. La baja sensibilidad y especificidad detectada en los métodos serológicos convencionales de ELISA e IFI para el dignóstico de una infección leishmánica como así también la alta reacción cruzada con pacientes chagásicos nos habla de la necesidad de implementar en la rutina de diagnóstico de leishmaniasis, métodos más sensibles y específicos como son los directos de detección del parásito en la etapa de lesión activa y la IDRM en la etapa de cicatriz acompañados de un diagnòstico clínico y serológico diferencial entre Leishmania sp y T. cruzi, especialmente en la zonas donde coexisten los vectores de ambas enfermedades.
Subject(s)
Leishmania/parasitology , Serologic Tests/nursing , Trypanosoma cruzi/parasitologyABSTRACT
La enfermedad de Chagas y la Leishmaniasis cutánea y mucocutánea son endémicas en el Paraguay y existen zonas del país donde coexisten ambas infecciones. Sabido es que existen reacciones cruzadas entre la infección por Trypanosoma cruzi y por Leishmaniasis sp, lo que constituye un problema para el diagnóstico diferencial, tema que ha sido considerado de la alta prioridad por la OMS. Al Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS) y al Laboratorio Central del Ministerio de Salud concurren pacientes provenientes de zonas de alta y media endemia para las dos infecciones, en los cuales el diagnóstico serológico diferencial está limitado por conocimiento insuficiente sobre reacciones cruzadas en nuestra población. Por dicho motivo se estudió en una primera etapa la sensibilidad y la especificidad de los métodos serológicos de ELISA e IFI para la detección de anticuerpos IgG anti Leishmania sp en donde se utilizó como método de referencia la Intradermo Reacción de Montenegro (IDRM). La sensibilidad y la especificidad de ELISA fué solo del 49 por ciento y 67 por ciento y la de IFI 27 por ciento y 75 por ciento respectivamente. En una segunda etapa se estudió cual era la factibilidad de diferenciar una infección a Leishmania sp de una infección a T. cruzi, utilizando en paralelo el método de ELISA para la detección de cada uno de los antígenos mencionados y testando los sueros positivos por inmunoblotting para anti T. cruzi. En los resultados se encontró resultados idénticos por ambos ELISA, mostrandonos una fuerte reacción cruzada. La baja sensibilidad y especificidad detectada en los métodos serológicos convencionales de ELISA e IFI para el dignóstico de una infección leishmánica como así también la alta reacción cruzada con pacientes chagásicos nos habla de la necesidad de implementar en la rutina de diagnóstico de leishmaniasis, métodos más sensibles y específicos como son los directos de detección del parásito en la etapa de lesión activa y la IDRM en la etapa de cicatriz acompañados de un diagnòstico clínico y serológico diferencial entre Leishmania sp y T. cruzi, especialmente en la zonas donde coexisten los vectores de ambas enfermedades
Subject(s)
Leishmania/parasitology , Serologic Tests/nursing , Trypanosoma cruzi/parasitologyABSTRACT
El presente estudio se realizó con el objetivo de determinar el rendimiento en exactitud de una cohorte de 58 laboratorios de análisis clínicos de Asunción. Los mismo participaron en forma ininterrumpida en programa de Evaluación Externa de la Calidad en Química Clínica de la Asociación de Bioquímicos y el Instituto de Investigaciones Ciencias de la Salud, en los años 1991 a 1994. En ese periódo se llevarón a cabo 9 evaluaciones de exactitud utilizando sueros control a un solo nivel de concentración en los que se midieron 13 analitos. En los primeros años se llevó a cabo un programa de intervención educativa en control de calidad interno en 71 laboratorios en forma confidencial y voluntaria, de los cuales 25 por ciento fueron públicos y 75 por ciento privados. Solo el 35 por ciento(25/71) de los laboratorios tuvo rendimiento satisfactorio, manteniendose este resultado hasta 12 meses después de la intervención. En los años posteriores, 58 laboratorios continuaron participando de la evaluaciones externas y de los cursos de capacitación. En las 9 evaluaciones se empleó el criterio del Colegio de Patólogos Americanos (CAP), que califica un rendimiento como satisfactorio por laboratorio cuando el 80 por ciento de los resultados son buenos o satisfactorios. Al analisar el rendimeinto de los 58 laboratorios que continuaron en forma ininterrumpida el estudio, detectamos un cambio significativo (p=0,002) a los 18 meses post-intervención educativa, con un rendimiento satisfactorio en el 67 por ciento (39/58) de los laboratorios. Dicho rendimiento se mantuvo hasta el final del estudio en el grupo de laboratorios, siendo a los 48 meses de 86 po ciento (50/58). En la comparación de la precisión interlaboratorio de 1991 a 1994, se observó que los coeficientes de variación se mantuvieron en su mayoria por encima de los alcanzados por el United Kigdom national External Quality Assessment Scheme. Los resultados de nuestros estudios sugieren que contínuos y regulares programas de evaluación externa de calidad contribuyen a mejorar el rendimiento de los laboratorios. Sin embargo, en nuestro país los coeficientes de variación continúan elevados, probablemente debido a que son aun pocos los laboratorios que tienen implementado un programa de control interno de claidad
Subject(s)
Biochemistry , /methods , Quality ControlABSTRACT
Este es un estudio descriptivo de cohorte para determinar cual era la transmisiòn congènita de toxoplasmosis en recièn nacidos de madres seropositivas por medio de la detecciòn de anticuerpos IgG e IgM anti T. gondii al nacer, y por seguimiento durante el primer año de vida a 50 niños de madres que dieron a luz en tres maternidades del Paraguay. El motivo que nos llevò a realizar este estudio es que nuestro paìs algunos gineco-obstetras apoyan la teorìa de que la transmisiòn puede efectivizarse por reactivaciòn de una infecciòn crònica. La serologìa basal fue realizada en sangre de cordòn de 632 niños del Instituto de Previsiòn Social (IPS), en suero de 500 madres de la Maternidad del Hospital de Clìnicas y en suero de 346 madres de puestos de salud del Dpto. de San Pedro. Las seroprevalencias de infecciòn a T. gondii detectadas en estas poblaciones fueron de 70 por ciento y 72 por ciento y 89 por ciento respectivamente. La prueba serològica empleada en el tamizaje basal fue el mètodo de ELISA indirecto, y en el seguimiento el ELISA doble sandwich para la detecciòn de IgM anti T. gondii. Se detectò un solo caso positivo con probable infecciòn congènita en la poblaciòn basal de 632 niños estudiados en la Maternidad del Instituto de Previsiòn Social. En los resultados serològicos obtenidos en los 50 niños, todos dieron resultados negativos por la prueba para detecciòn de anticuerpos IgM anti T. gondii al nacer y durante el primer año de vida. Presentando uno de ellos, seroconversiòn a los 15 meses, probablemente por infecciòn adquirida. La ausencia de transmisiòn congènita de toxoplasmosis en los niños del estudio, cuyas madres tenian serologìa de infecciòn crònica apoya la teorìa mundialmente reconocida que el riesgo de transmisiòn es en aquellas madres con primoinfecciòn durante el embarazo. Por esta razòn en paìses como el nuestro donde el diagnòstico de infecciòn congènita es muy costoso, serìa conveniente realizar un estudio serològico previo al llegar la mujer a la edad fèrtil
Subject(s)
Serologic Tests/nursing , Toxoplasma/chemistry , Toxoplasma/parasitology , Toxoplasmosis, Congenital/nursing , Toxoplasmosis, Congenital/epidemiologyABSTRACT
Trescientos setenta y dos muestras de suero fueron estudiadas para evaluar la sensibilidad, especificidad, reproductibilidad y estabilidad de una prueba de ELISA "TOXO TEST, IICS" para detecciòn de anticuerpos IgG e IgM anti-Toxoplasma gondii. Los resultados fueron obtenidos por comparaciòn con los mètodos de inmunofluorescencia indirecta, immunoblotting y ELISA doble sandwich. Se determinaron valores de sensibilidad y especificidad mayores a 95 por ciento con un valor predictivo positivo de 98 por ciento en el ELISA IgG que posibilita su utilizaciòn en el diagnòstico serològico en nuestro paìs. Con el mètodo de ELISA IgM se obtuvo alta sensibilidad y especificidad en sueros de pacientes con infecciòn menor o igual a 1 año, pero se obtuvieron reacciones falsas positivas en pacientes sin sintomatologìa clinica que tenian infecciones antiguas o crònicas. En la evaluaciòn se detectò ademàs una estabilidad de 12 meses en todos los componentes del reactivo y la precisiòn interensayo en los sueros controles menor a 20 por ciento de coeficiente de variaciòn. Los resultados obtenidos en la evaluaciòn del "TOXO TEST, IICS" nos muestran la factibilidad de su utilizaciòn en la evoluciòn de una infecciòn aguda por toxoplasmosis y en el diagnòstico de una infecciòn antigua crònica. Sin embargo no se recomienda la utilizaciòn del ELISA IgM para el diagnòstico de infecciòn aguda de un paciente sin sintomatologìa clìnica por las reacciones falsas positivas detectadas en pacientes crònicos, por lo cual se requiere una prueba mas especìfica que elimine los factores de interferencia...
Subject(s)
Toxoplasma/parasitology , Immunoglobulin M/deficiency , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay/nursing , Toxoplasmosis/diagnosis , IgG Deficiency/diagnosis , Enzyme Multiplied Immunoassay Technique/nursing , Enzyme Multiplied Immunoassay Technique/statistics & numerical dataABSTRACT
El megacolon es una de las manifestaciones clínicas de la etapa crónica de la enfermedad de Chagas, cuyo agente etiológico es el Trypanosoma cruzi. Se postula de que las manifestaciones clínicas en la enfermedad de Chagas sean producto de un proceso autoinmune, debido a que no se identifica fácilmente la presencia de parásitos en el tejido afectado de pacientes crónicos. Con el objeto de detectar la presencia del T. cruzi en segmentos colónicos quirúrgicamente resecados de individuos chagásicos crónicos se emplearon técnicas moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) e hibridación con sondas específicas en muestras de tejido parafinado de 10 pacientes con megacolon chagásico. de cada segmento se estudiaron 5 secciones diferentes teniendo en cuenta el número de células ganglionares afectadas. Se detectó por Southern blot la presencia de ADN de T. cruzi en 7 de los 50 secciones analizadas. No se observó una correlación entre la presencia de parásitos y la alteración del número de células ganglionares y en ningún caso analizado se ha detectado la presencia de parásitos en sangre circulante. Se demuestra por vez primera la presencia de T. cruzi en tejido parafinado de pacientes con megacolon chagásico
Subject(s)
Trypanosoma cruzi , Polymerase Chain Reaction , Chagas Disease , Megacolon/nursing , Megacolon/pathologyABSTRACT
A simple and inexpensive assay for detection of H2S producing bacteria in drinking water was evaluated in Paraguay. Using an improved preparation procedure, results were basically temperature independent in the range of 22-37ºc and correlated well with the presence of total coliform bacteria (96 percent, 28ºc). The assay was not suitable for control of surface water and dug well water due to the frequent presence of non-faecal coliforms. However, it was very suitable for routine control of high quality water-systems, like treated community water systems or deeep-tube well water, where complete absence of coliforms is required a laboratory technician or special equipament. Its use permits a cost-effective routine control of high quality community water systems in developing countries. In addition, this test turned out to be an effective educational tool for heightening the awareness of people towards dangers of unclean drinking water